菌種保藏的常見方法
菌種保藏是指保持微生物菌株的活力和遺傳性狀的技術(shù)。微生物在使用和傳代過程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡,因而常常造成菌種的衰退。菌種保藏的目的就是使菌株存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的活性和各種特征。菌種保藏的基本原理是使微生物的生命活動處于半永j性的休眠狀態(tài),也就是將微生物的新陳代謝作用限制在z低范圍內(nèi)。那么你知道菌種保藏的常見方法有什么嗎?讓我們一起來看看吧!
實(shí)驗(yàn)室常用的保菌方法有:甘油保菌法、斜面保菌法、穿刺保菌法、液體石蠟覆蓋保藏法、沙土保藏法、冷凍干燥法。微基生物在以上幾種菌種保藏方法的基礎(chǔ)上,開發(fā)出了保菌效果更好瓷珠保菌法。
一、甘油保菌法
此方法適用于菌種的中長期保藏,保藏時間可在1年以上。由于甘油本身十分粘稠,很難定量,因此一般將甘油和生理鹽水按1:1的比例配成終濃度為50%的甘油溶液。使用時,按50%甘油:菌液=1:1的比例混合,使甘油終濃度在20-30%即可,甘油濃度過高或過低都不利于菌種保藏。將甘油菌種轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱長期凍存。需要取用菌種的時候,將凍存管放在37℃水浴中快速解凍,直到菌種完q融化,此時可取出菌種進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
二、斜面保菌法
將菌種接種在適宜的固體斜面培養(yǎng)基上,待菌充分生長后轉(zhuǎn)移至4℃冰箱中保藏。保藏的時間根據(jù)微生物的種類而不同,一般霉菌、放線菌及產(chǎn)芽孢的細(xì)菌保存2-4個月就需要移種一次,酵母菌為兩個月,而細(xì)菌最好一個月移種一次。需要取用菌種的時候,可用接種環(huán)在斜面上挑取少量菌體進(jìn)行接種。
三、穿刺保菌法
準(zhǔn)備一管半固體培養(yǎng)基,用接種針挑取菌種,自半固體培養(yǎng)基的中心垂直刺入,直至接近試管底部,但不要穿透,然后沿原穿刺線將接種針退出,于4℃冰箱保存。此方法同斜面保菌法一樣需要定期移種。
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