QIAamp Power Fecal Pro DNA Kit在PowerFecal原有技術的基礎上,采用新型微球管和優(yōu)化的化學成分,可更高效地裂解細菌和真菌。抑制劑的去除已經簡化,使研究人員能夠更快地從糞便和腸道樣本中消除具有挑戰(zhàn)性的抑制劑。這導致總 DNA 通過在下游測試中觀察到的操作分類單元 (OTU) 揭示更高的 α 多樣性。采用簡化的抑制劑去除技術(Inhibitor Removal Technology,IRT),在去除抑制劑方面效率高,同時還能縮短樣品處理時間。QIAamp PowerFecal Pro DNA試劑盒的A260/A280比值也最高,接近1.8,表明其不含抑制劑。使用QIAamp PowerFecal Pro DNA Kits處理的樣品之間的變異性也較小。與第一代QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit和其他市售試劑盒相比,使用QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit的研究人員可以從糞便樣本中鑒定出更大的細菌多樣性和OTU數。
二、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804實驗步驟
1.稱取200ul樣品在2ml的離心管中,離心管放在冰上。
2.每個樣品添加1mlInhibitEXBuffer,然后持續(xù)旋渦混合1min或者直到樣品混合均勻。
3.在70℃加熱懸浮液5min(難以溶解的細胞溶解溫度可以提高到95℃),然后旋渦混合15s。
4.離心樣品1min析出沉淀。
5.另取1.5ml離心管加15ulProteinaseK。
6.移取200ul步驟4的上清液至1.5ml含ProteinaseK的離心管中。
7.然后添加200ulBufferAL,旋渦混合15s。(注意:不要直接添加ProteinaseK到BufferAL中,樣品和BufferAL必須充分混合成均勻混合液)
8.70℃孵育10min。
9.添加200u1乙醇到溶解液中,旋渦混合。
10.小心移取600ul步驟9的裂解液到QIAamp旋轉柱中,蓋上蓋子,離心1min。
把QIAamp旋轉柱放到一個新的2ml的收集管中,丟掉含有濾液的管。11.小心打開QIAamp旋轉柱,添加500ulBufferAW1,離心1min。把QIAamp旋轉柱放到一個新的2ml收集管中,丟掉包含濾液的收集管。
12.小心打開QIAamp旋轉柱,添加500ulBufferAW2,離心3min,丟掉包含濾液的收集管。
13.把QIAamp旋轉柱放到一個新的2ml的收集管中,丟掉舊的含有濾液的收集管,離心3min。
14.把QIAamp旋轉柱放到一個新的1.5ml的離心管,直接移取200ulBufferATE
到QIAamp薄膜上。室溫孵育1min,然后離心1min洗提DNA。通過UV吸收度判斷DNA純度,使用BufferATE做空白設計避免結果錯誤。
三、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804注意事項
1.準備好70℃水浴鍋。
2.所有的離心操作都在室溫下(15-25℃),14000轉/分鐘
3.用BufferAL和InhibitEXBuffer溶解任何沉淀都要加熱和混勻。
4.Buffer AW1和Buffer AW2都加乙醇。
5.使用之前混合所有緩沖液。
四、凱杰qiagen糞便DNA提取試劑盒51804規(guī)格表
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
51804 | QIAamp PowerFecal Pro DNA Kit | 50 preps |
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