細胞培養(yǎng)到底選用培養(yǎng)瓶?培養(yǎng)皿?還是培養(yǎng)板?這個問題的答案是:根據(jù)實驗?zāi)康暮托枰獊磉M行選擇!來讓我們一起看看培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板的選擇吧!
一、培養(yǎng)瓶
如果實驗?zāi)康氖桥囵B(yǎng)原代細胞和常規(guī)的傳代細胞,一般選擇用培養(yǎng)瓶,可獲得大量實驗用細胞。培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,例如T25、T75、T175,數(shù)字就是表面積,T25就是25cm2,T75就是75cm2,T1755就是175cm2。
常見的細胞培養(yǎng)瓶分為一次性的塑料瓶和玻璃瓶,他們各有特色。玻璃瓶的優(yōu)點是:成本低、透光性強、可重復(fù)使用,缺點是:難于清洗,不易保存。塑料瓶的優(yōu)點是:質(zhì)地均勻、產(chǎn)量大、成本低、便捷性強,缺點是:其表面具有疏水性,不利于細胞貼壁生長,需要通過特殊的工藝處理,例如射線照射、電離輻射,這樣處理過的表面細胞才能更好的貼在上面生長。
如果選擇培養(yǎng)瓶培養(yǎng),還應(yīng)該盡量選擇有斜肩設(shè)計、帶透氣孔瓶蓋的型號。
斜肩設(shè)計可以避免培養(yǎng)瓶平放后,過多的培養(yǎng)基接觸瓶蓋造成污染,帶透氣孔瓶蓋可以保持內(nèi)外的二氧化碳濃度一致。如果瓶蓋不透氣,那在放進培養(yǎng)箱時,應(yīng)擰松一圈,以便內(nèi)外氣體能順利交換。
二、培養(yǎng)皿
培養(yǎng)皿的操作比較方便,不管是換液、傳代、還是收獲細胞,但因為其開口很大,所以容易污染,如果你是新手,不建議直接用培養(yǎng)皿養(yǎng)細胞。
三、培養(yǎng)板
以細胞為載體或?qū)ο蟮膶嶒炇褂门囵B(yǎng)板較好,如藥敏試驗、MTT(96孔培養(yǎng)板)、免疫組化(6孔培養(yǎng)板)等。
選擇好合適的孔板后,在培養(yǎng)階段,有2點注意事項:
(1)多孔板會帶板蓋,但其密封性不好,在培養(yǎng)箱內(nèi)會造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高,進而影響細胞生長速率。有條件的同學(xué),可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜?;蛘呱釛夁吘壙孜唬⒉捎锰砑优囵B(yǎng)基來代替。
(2)當細胞種入孔內(nèi)以后,不應(yīng)該再進行過多的震動,例如晃動、抖動培養(yǎng)板,而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。如果培養(yǎng)箱由多人共用,還應(yīng)該考慮大家頻繁開關(guān)箱門、拿放孔板造成的震動,這些不利因素都應(yīng)該盡量減少。
需要注意的是,培養(yǎng)板相對更容易受到污染,所以操作時要格外小心。
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