技術(shù)文章
在單細(xì)胞測(cè)序和類器官研究蓬勃發(fā)展的今天,脾臟作為機(jī)體最大的外周免疫器官,其單細(xì)胞懸液制備已成為免疫學(xué)研究的關(guān)鍵突破口。傳統(tǒng)機(jī)械解離法導(dǎo)致細(xì)胞活性低于60%、關(guān)鍵免疫細(xì)胞亞群丟失等問(wèn)題,嚴(yán)重制約研究精度。百奧益康脾臟組織解離試劑盒通過(guò)創(chuàng)新性「酶-機(jī)械協(xié)同解離體系」,將細(xì)胞活性提升至95%以上,為免疫圖譜構(gòu)建提供高保真解決方案。
核心技術(shù)原理:三步實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)解離
1. 智能酶解系統(tǒng)
試劑盒核心采用 復(fù)合蛋白酶優(yōu)化配方(含膠原酶IV+中性蛋白酶+DNAse I):
·膠原酶IV:特異性切割脾被膜膠原纖維(作用溫度37℃±0.5℃)
·中性蛋白酶:溫和解離脾小體結(jié)構(gòu),保護(hù)CD4+/CD8+ T細(xì)胞表面標(biāo)記
·DNAse I:實(shí)時(shí)降解游離DNA,避免細(xì)胞團(tuán)塊二次聚集
2. 梯度機(jī)械解離
配套zhuan-li溫控震蕩儀(30-50Hz可調(diào)頻率)實(shí)現(xiàn):
·初級(jí)解離:低頻震蕩(35Hz)分離紅髓與白髓
·精細(xì)解離:高頻脈沖(45Hz/0.5s間隔)釋放邊緣區(qū)B細(xì)胞
3. 活性保護(hù)機(jī)制
·含 細(xì)胞膜穩(wěn)定劑:維持Na+/K+泵功能,ATP水平>2.5μmol/10^6 cells
·抗氧化體系:GSH(谷胱甘肽)濃度維持5-8mM,降低ROS損傷
技術(shù)突破:對(duì)比傳統(tǒng)方法優(yōu)勢(shì)顯著
指標(biāo) | 傳統(tǒng)方法 | 百奧益康試劑盒 |
細(xì)胞活性 | 58±12% | 95±3% |
解離時(shí)間 | 90-120分鐘 | 35-45分鐘 |
巨噬細(xì)胞回收率 | ≤40% | 82% |
表面標(biāo)志物保留 | CD19丟失>30% | CD19保留率93% |
四大應(yīng)用場(chǎng)景精準(zhǔn)覆蓋
·免疫細(xì)胞分選:適用于DC細(xì)胞、記憶T細(xì)胞等稀有亞群分離
·單細(xì)胞測(cè)序建庫(kù):10x Genomics平臺(tái)兼容性驗(yàn)證通過(guò)(Cell Ranger匹配度>99%)
·類器官構(gòu)建:支持脾臟類器官3D培養(yǎng),初始細(xì)胞存活率>90%
·藥物毒性評(píng)估:準(zhǔn)確檢測(cè)免疫抑制劑對(duì)Treg細(xì)胞的影響(CV值<8%)
用戶實(shí)證:科研機(jī)構(gòu)的效率革命
案例:某三甲醫(yī)院免疫學(xué)研究組使用本品后:
·單樣本處理時(shí)間從4小時(shí)縮短至1.5小時(shí)
·流式細(xì)胞術(shù)分析中γδ T細(xì)胞檢出率提升3.2倍
·單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中 ribosomal RNA占比<15%(達(dá)到SRA數(shù)據(jù)庫(kù)收錄標(biāo)準(zhǔn))
結(jié)語(yǔ):開(kāi)啟高保真解離新時(shí)代
百奧益康脾臟組織解離試劑盒(貨號(hào):BA3324)已通過(guò)ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證,配套提供 個(gè)性化解離方案設(shè)計(jì)服務(wù)。更多有關(guān)百奧益康脾臟組織解離試劑盒的文章,歡迎咨詢百奧益康試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!
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