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CRISPR-Cas9 是近年興起的用于靶向基因組特定位置，進行DNA修飾的重要工具。研究發(fā)現(xiàn)CRISPR是細菌為了應對病毒的攻擊而演化而來的獲得性免疫防御機制。具體來說，在CRISPR和Cas9的作用下，經(jīng)由小RNA分子的引導，靶向并沉默入侵者遺傳物質(zhì)核酸的關鍵部分。在該系統(tǒng)中，crRNA（CRISPR-derived RNA）與tracrRNA（trans-activating RNA）結合形成的復合物能特異性識別靶基因序列，并引導Cas9核酸內(nèi)切酶在靶定位點剪切雙鏈DNA，隨后，細胞的非同源末端連接修復機制（NHEJ）重新連接斷裂處的基因組DNA，并引入插入或缺失突變。另外也可以提供一個外源雙鏈DNA供體片段（Donor）通過同源重組（HR）整合進斷裂處的基因組，從而達到對基因組DNA進行修飾的目的。
目前，CRISPR-Cas9系統(tǒng)的基因組編輯功能已被應用于多種生物，包括小鼠、大鼠、斑馬魚、秀麗隱桿線蟲，也包含多種細菌和植物，甚在人體上也有應用。
基因編輯與RNA干擾的區(qū)別
方法 | 靶標 | 質(zhì)粒構建 | 基因表達 | 基因敲除 | 基因定點突變 | 基因組改變 | 遺傳密碼子改變 | 遺傳性 |
RNAi | mRNA （轉錄水平） | 簡單 | 下調(diào) | 否 | 否 | 否 | 否 | 可借助病毒實現(xiàn) |
CRISPR-CAS9 | DNA序列（基因組水平） | 簡單 | 敲除 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 |
TALEN | DNA序列（基因組水平） | 復雜 | 敲除 | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 |
基因編輯技術優(yōu)勢
1、操作簡單，靶向性高。
2、可實現(xiàn)對靶基因特定位點定點敲除。
3、可同時對多個靶基因進行敲除。
4、可應用于任何物種。
5、CRISPR-Cas9系統(tǒng)是由RNA調(diào)控的對DNA的修飾，可穩(wěn)定遺傳。
服務項目
普通載體、Cas9/Donor腺病毒顆粒、Cas9慢病毒顆粒
定制gRNA和HR供體載體
基因敲除細胞株
Gene Knock-Out，Knock-in或Gene標記
客戶需要提供材料
1、物種、基因名稱或者基因ID；
2、提供靶細胞。
服務流程
1、提交項目課題相關需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術團隊討論項目細節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實驗方案進行修改。
4、雙方均滿意并達成一致，簽訂技術服務合同。
5、開展實驗，按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結題，提供實驗原始結果和分析結果、實驗流程、實驗條件等等。
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